Autor: Piotr Solarz (P.Solarz_at_INT.PAN.WROC.PL)
Data: Wed 23 Jan 2002 - 14:16:19 MET
Wednesday, January 23, 2002, 1:26:42 PM, you wrote:
Postaram się pomóc :))
WM> Czy mieszanine na jonit mozna nanosic w dowolnym rozpuszczalniku WM> czy tylko w wodzie?
Jakieś wodne bufory takie by np. pH było o jednostkę niższe od pKa. Jednak nie stężone.
WM> Jakie powinno byc pH nanoszonego roztworu?
Gdzieś o jednostkę niżesz od pKa, może być nawet trochę bardziej.
WM> Czy na kationicie powiesi sie tylko amina czy zwitterion aminokwasu WM> tez?
Nie wiem co to zwintterion :)) Zawieszą się te aminy (aminokwasy) które mają uprotonowaną resztę aminową. To czy jest uprotonowana, zależy od pKa aminokwasu, białka i twojego pH buforu.
WM> Czy sole nieorganiczne (Na+, K+) tez sie powiesza na kationicie i czy WM> beda mialy wieksze czy mniejsze powinowactwo niz NH4+? Innymi WM> slowy jak naniose mieszanine soli i aminokwasu, to co sie zatrzyma a WM> co zejdzie z kolumny?
Ja na przykład używałem do wymywania 1M NaCl w tym samym buforze co białko ale już oczywiście bez niego. Po za tym "regeneruje" to kolumnę.
WM> Jak nalezy przechowywac kationit (suchy czy wilgotny) i dlaczego?
Raczej wilgotny ale by go zabezpieczyć przemyj (pozostaw ją) /w 20% etanolu. Zawsze po takim rozdziale zostaną ci ślady aminokwasów co jest równoważne z namnorzeniem się grzybów i bakterii.
WM> Ile kationitu nalezy uzywac do procesu?
Sprawdź doświadczalnie kiedy kolumna zaczyna Ci puszczać i nie łapie już aminokwasów, zresztą jej pojemność powinna być chyba w specyfikacji.
-- Piotr
To archiwum zostało wygenerowane przez hypermail 2.1.7 : Thu 08 May 2003 - 14:50:17 MET DST